平成22(行ケ)10203 審決取消請求事件

- 1 -平成２４年５月２８日判決言渡平成２２年（行ケ）第１０２０３号審決取消請求事件口頭弁論終結日平成２４年４月１６日判決 原告イッサムリサーチディヴェロップメントカンパニーオブザヘブリューユニバーシティオブエルサレムエルティディー 訴訟代理人弁理士河村 洌 藤森洋介 谷 征史訴訟復代理人弁理士三嶋眞弘 被告特許庁長官指定代理人六笠紀子 鵜飼 健 瀬良聡機 田村正明 主文 特許庁が不服２００６－７７８２号事件について平成２２年２月９日にした審決を取り消す。 - 2 -訴訟費用は被告の負担とする。 事実及び理由 第１ 原告が求めた判決主文同旨 第２ 事案の概要本件訴訟は，特許出願拒絶査定を不服とする審判請求を成り立たないとした審決の取消訴訟である。争点は，本願発明の進歩性（容易想到性）の有無である。 １ 特許庁における手続の経緯原告は，平成１０年１０月４日，パリ条約による優先日を１９９７年（平成９年）１０月３日，優先権主張国を米国として，名称を「腫瘍特異的細胞傷害性を誘導するための方法および組成物」とする発明の特許出願をしたが（特願２０００－５１４９９３号），平成１８年１月１８日，拒絶査定を受けたので，平成１８年４月２４日，不服審判請求をするとともに（不服２００６－７７８２号），平成２２年１月１４日，請求項１等の特許請求の範囲の記載の一部を改める旨の本件補正をした。 特許庁は，平成２２年２月９日，「本件審判の請求は，成り立 判請求をするとともに（不服２００６－７７８２号），平成２２年１月１４日，請求項１等の特許請求の範囲の記載の一部を改める旨の本件補正をした。 特許庁は，平成２２年２月９日，「本件審判の請求は，成り立たない。」との審決をし，この謄本は平成２２年２月２３日に原告に送達された。 ２ 本願発明の要旨本願発明は，腫瘍細胞における異種遺伝子，特に細胞傷害性生成物をコードする遺伝子の特異的発現に関する発明で，本件補正後の請求項の数は１３であるが，そのうち本件補正後の請求項１（本願発明１）の特許請求の範囲の記載は次のとおりである。 【請求項１（平成２２年１月１４日付け手続補正書に記載のもの）】「細胞傷害性の遺伝子産物をコードする異種配列に機能的に連結されたH19調節配列を含むポリヌクレオチドを含有する，腫瘍細胞において配列を発現させるため - 3 -のベクターであって，前記腫瘍細胞が膀胱癌細胞または膀胱癌である，前記ベクター。」 ３ 審決の理由の要点本願発明１は，その優先日当時，下記引用例１に記載された発明（引用発明１）に甲第３ないし６号証（引用例３ないし６）に記載された事項を組み合わせることで，当業者が容易に発明できたもので進歩性を欠く。 【引用例１】特表平９－５０４９５５号公報（甲１）【引用例３】Mol.Pathol.,Vol.50（Feb,1997）３４ないし４４頁（甲３）【引用例４】TheEMBOJournal, Vol.7, No.3（1988）６７３ないし６８１頁（甲４）【引用例５】MolecularandCellularBiology, Vol.8, No.11（1988）４７０７ないし４７１５頁（甲５）【引用例６】Am. J. Hum. Genet., Vol.53（1993）１１３ないし１２４頁（甲６ arBiology, Vol.8, No.11（1988）４７０７ないし４７１５頁（甲５）【引用例６】Am. J. Hum. Genet., Vol.53（1993）１１３ないし１２４頁（甲６）【一致点】「細胞傷害性の遺伝子産物をコードする異種配列に機能的に連結された調節配列を含むポリヌクレオチドを含有する，腫瘍細胞において配列を発現させるためのベクター」である点。 【相違点】・相違点(i)該調節配列が，本願発明１は，’Ｈ１９’の調節配列であるのに対し，引用発明１は，Ｈ１９の調節配列ではない点・相違点(ii)該腫瘍細胞が，本願発明１は，膀胱癌細胞又は膀胱癌であるのに対し，引用発明１は，膀胱癌細胞又は膀胱癌と特定されていない点【相違点に係る構成の容易想到性の判断（７，８頁）】「（１） 上記相違点（ｉ）について引用例１の上記２．（１）ア（判決注：請求項１の特許請求の範囲）記載の，癌における遺伝子治療のための組換えベクターである欠損組換えアデノウイルスに含まれる発現シグナル即 - 4 -ちプロモーターとしては，引用例１の上記２．（１）カ（判決注：１１頁１１行～１８行）記載より，正常細胞中では不活性であり且つ腫瘍細胞では活性を示すものが使用されている。 ここで，引用例３の上記２．（２）ア～ウ（判決注：３４頁左欄１２～１６行，２７～２９行，３５頁下段）記載より明らかなように，そもそもＨ１９遺伝子は，胚の初期段階から胎児期を通じ多数の異なる胚組織で豊富に発現するものの，出生後にはＨ１９遺伝子の発現は抑制されること，しかしながら，出生後，Ｈ１９遺伝子は子供や成人の膀胱癌を含む多種の腫瘍で発現することは，本件優先日前，既に公知であった。 この公知事項に基づけば，出生後において，Ｈ１９遺伝子は，正常組織では発現しな かしながら，出生後，Ｈ１９遺伝子は子供や成人の膀胱癌を含む多種の腫瘍で発現することは，本件優先日前，既に公知であった。 この公知事項に基づけば，出生後において，Ｈ１９遺伝子は，正常組織では発現しないものの，膀胱癌を含む多種の腫瘍では発現していることから，このＨ１９遺伝子の発現を調節している配列即ちプロモーターは，α－フェトプロテインプロモーターと同様に，成人の癌細胞で優先的に発現させるよう機能するが，子供や成人の正常細胞（非疾患細胞）では発現しないように抑制されていると，当業者であれば普通に理解することである。 そして，このＨ１９遺伝子の発現を調節しているプロモーターについては，引用例４の上記２．（３）ア，イ（判決注：６７６頁右欄上から９行～下から６行，６７７頁図４）記載，引用例５の上記２．（４）ア，イ，エ，オ（判決注：４７０８頁右欄『RESULTS』の項の下から１０行～２行，４７０９頁図１，４７１０頁図２，４７１３頁図６）記載及び引用例６の上記２． （５）イ（判決注：１１５頁図１）記載より，本件優先日前既に公知であった。 そうすると，引用例１の上記２．（１）ア（判決注：請求項１の特許請求の範囲）記載の欠損組換えアデノウイルスに含まれる発現シグナル即ちプロモーターとして，引用例３の上記２． （２）ア～ウ（判決注：３４頁左欄１２～１６行，２７～２９行，３５頁下段）記載に基づき，正常細胞中では不活性であり且つ腫瘍細胞では活性を示すと理解できる，Ｈ１９遺伝子の発現を調節しているプロモーターを用いることは，当業者が容易に想到し得ることである。そして，該Ｈ１９遺伝子のプロモーターは，引用例４～６の記載から明らかなように，当業者が容易に利用できるものに過ぎない。 （２） 上記相違点（ｉｉ）について引用例３の上記２．（２）ウ（判決注：３５頁下段 該Ｈ１９遺伝子のプロモーターは，引用例４～６の記載から明らかなように，当業者が容易に利用できるものに過ぎない。 （２） 上記相違点（ｉｉ）について引用例３の上記２．（２）ウ（判決注：３５頁下段）表１中腫瘍の欄の『膀胱癌』が記載されているのであるから，該腫瘍細胞として膀胱癌細胞または膀胱癌を選択することも，当業者が容易になし得たことである。」 第３ 原告主張の審決取消事由 １ 引用発明１と本願発明１との一致点及び相違点の認定の誤り（取消事由１）引用発明１は，実際には，エプスタイン－バールウイルス（ＥＢＶ）が関係するバーキットリンパ腫，上咽頭癌や，パピローマウイルスが関係する子宮頸癌に対し - 5 -て，各ウイルスにより誘導可能なプロモーターの調節下に毒性遺伝子を含む，組換えアデノウイルスを使用することで，腫瘍細胞に特異的に毒性遺伝子を発現させるものであって，毒性遺伝子を腫瘍細胞に特異的に発現させることができるかは，当該プロモーターが，当該腫瘍の原因となるか又は当該腫瘍に関係するウイルスによって誘導されるか否かと関連する。 そうすると，引用例１の特許請求の範囲に「１．腫瘍細胞内で特異的に活性を示す発現シグナルの調節下に異種ＤＮＡ配列を含む，欠損組換えアデノウイルス」，「１５．癌の治療および／または予防が意図される薬剤学的組成物を調製するための，請求の範囲１～１４の内の一つに記載のアデノウイルスの使用。」との記載があり，１０頁８ないし１０行に，技術的課題に関して，「腫瘍の原因となるかもしくは腫瘍に関連するウイルスの存在により誘導されるかもしくはその存在下で活性を示す発現シグナルである」との記載があるとしても，これは膀胱癌に特異的に毒性遺伝子を発現させるプロモーター等や，同プロモーターを誘導するウイルスを開示するものでは されるかもしくはその存在下で活性を示す発現シグナルである」との記載があるとしても，これは膀胱癌に特異的に毒性遺伝子を発現させるプロモーター等や，同プロモーターを誘導するウイルスを開示するものではない。 したがって，ヒト肝癌細胞株ＨｅｐＧ２では不活性であるＨ１９エンハンサーの膀胱癌における特性を考慮することなく，本願発明１にいう「調節配列」が引用発明１の「発現シグナル」に相当するとした審決の判断は誤りである。 また，本願発明１のベクターは非ウイルスベクターであり，引用発明１のアデノウイルスベクターとは，その作用機序も効果も異なる。すなわち，本願発明１の非ウイルスベクターは，（腫瘍）組織特異的なプロモーター等を用いて自殺遺伝子等を働かせる戦略のものであるが，引用発明１のアデノウイルスベクターは，腫瘍細胞の表面にある腫瘍細胞特異的な標的を手掛かりに腫瘍細胞にのみ感染するようなウイルスベクターを使用する戦略の一変形例であって，導入遺伝子（異種ＤＮＡ）の発現の着眼点も作用機序も異なる。しかも，ウイルスベクターについては安全面での懸念がある。そうすると，本願発明１の「腫瘍細胞において配列を発現させるためのベクター」が引用発明１の「欠損組換えアデノウイルス」に相当するとした審 - 6 -決の判断は誤りである。 よって，本願発明１と引用発明１とが，「細胞傷害性の遺伝子産物をコードする異種配列に機能的に連結された調節配列を含むポリヌクレオチドを含有する，腫瘍細胞において配列を発現するためのベクター」で一致するとの審決の判断は誤りであり，審決の認定には相違点の看過がある。 ２ 相違点に係る構成の容易想到性の判断の誤り（取消事由２）(1)アそもそも，腫瘍細胞（癌細胞）で優先的に発現している数多くの公知の遺伝子のプロモーターの中から，腫瘍細胞に 違点の看過がある。 ２ 相違点に係る構成の容易想到性の判断の誤り（取消事由２）(1)アそもそも，腫瘍細胞（癌細胞）で優先的に発現している数多くの公知の遺伝子のプロモーターの中から，腫瘍細胞に特異的かつ高レベルで異種配列を発現できるプロモーターを見出すことは当業者にとって容易ではなかった。 すなわち，例えばα－フェトプロテイン（ＡＦＰ）遺伝子は肝細胞癌で発現するところ，ＡＦＰプロモーターがＡＦＰ遺伝子を発現させているのは，ＡＦＰを過剰に発現（産生）する腫瘍細胞に限定されており，ＡＦＰを発現するレベルが低い細胞に対しては，ＡＦＰプロモーターは弱い活性しか有せず，導入遺伝子の発現効率は小さい。乳癌等の細胞で活性を有するＣＥＡプロモーターも，その活性が低く，ＣＥＡプロモーターを使用した研究では真に意味のある抗腫瘍効果は示されなかった。このとおり，ある腫瘍細胞（癌組織）で特異的に発現している遺伝子であるとしても，当該遺伝子の発現を調節するプロモーターを用いて，実際に治療に用いることができる程度に導入遺伝子を発現できるほど活性が高いとは限らないというのが，本件優先日当時の当業者の技術常識であった。 むしろ，本件優先日当時のみならず，８年が経過した２００５年当時においても，腫瘍細胞に特異的に作用するプロモーターの大部分が十分に導入遺伝子を発現させることができず，活性が弱いということが当業者の技術常識であった。このとおり，低いプロモーターの活性から，生体内での抗腫瘍効果を示した研究成果はほとんど存在せず（そこで，細胞特異的に働くＣｒｅ発現ウイルス（スイッチウイルス）で標的細胞を感染させ，同ウイルスの活性の低い細胞特異的プロモーターで標的細胞にＣｒｅを発現させるとともに，Ｃｒｅ依存的に目的遺伝子を発現させるアデノウ - 7 -イルスベクター ッチウイルス）で標的細胞を感染させ，同ウイルスの活性の低い細胞特異的プロモーターで標的細胞にＣｒｅを発現させるとともに，Ｃｒｅ依存的に目的遺伝子を発現させるアデノウ - 7 -イルスベクターで標的細胞を感染させ，同ウイルスの強力な汎用プロモーターで目的遺伝子をＣｒｅ依存的に発現させて，標的細胞に特異的に目的遺伝子（治療遺伝子）を発現させる方法（二重感染法）が開発されてきた。），癌（腫瘍）細胞に特異的に効果を奏し，正常細胞に対して副作用を呈さない優れた抗癌用遺伝子治療用ベクターは未だ開発の途上にある。 また，遺伝子の転写機構は，今日でも全ての因子が明らかになっていない複雑なもので，様々な機能を有するタンパク質が複雑に相互作用するものであるところ，プロモーターの不活性化の機序も十分に解明されておらず，導入遺伝子を高いレベルで発現させることができるベクターの開発は，本件優先日から７年後の時点においても，依然として偶然による発見の結果にすぎなかった。導入遺伝子を挿入しても，ＲＮＡポリメラーゼその他が正しく相互作用して遺伝子の転写が開始され，他の因子による阻害作用を受けずに，生体内で毒性遺伝子を治療に応用可能な程度に高レベルで発現させることができるかどうかは，決して単純，容易なことではなく，腫瘍細胞で発現していることが知られている遺伝子のプロモーターをベクターに組み込めば容易に解決手段が得られるというような性格のものではない。 しかも，Ｈ１９遺伝子はタンパク質に翻訳されず，ｍＲＮＡを産生するに止まるものであるところ，現時点においてすらタンパク質に翻訳がされないｍＲＮＡの作用機序は明らかでなく，当業者が最終産物がタンパク質でない遺伝子のプロモーターを選択して，タンパク質の発現にわざわざ使用するとは考え難い。 イところで，真に腫瘍細胞に特 翻訳がされないｍＲＮＡの作用機序は明らかでなく，当業者が最終産物がタンパク質でない遺伝子のプロモーターを選択して，タンパク質の発現にわざわざ使用するとは考え難い。 イところで，真に腫瘍細胞に特異的に発現する遺伝子は，本件優先日当時のみならず，６年が経過した２００３年当時においても，テロメラーゼのみであり，腫瘍細胞中で導入遺伝子を選択的に発現させるために用いられているプロモーターも，テロメラーゼのプロモーターのみであった。Ｐａｎらがテロメラーゼのプロモーターを用いて導入遺伝子（誘導遺伝子）を腫瘍細胞内で特異的に発現させ，腫瘍細胞を破壊することを報告したのは，本件優先日から２年が経過した１９９９年になってからであった。しかも，ＨＳＶ－ＴＫなどの細胞毒性遺伝子を腫瘍細胞に導 - 8 -入し，ガンシクロビルなどの細胞傷害性プロドラッグを投与して腫瘍細胞を死滅させる治療の効果は一時的なものにすぎず，延命に繋がったとの報告は存しなかった。 引用例１には，ＡＦＰプロモーターやＩＧＦ－ⅡＰ３プロモーターを用いて肝腫瘍細胞中で導入遺伝子を発現させることが記載されているが，実際に行われたのは，キメラプロモーターＥＢＮＡ１－ＲＥ／ＴＰ１の制御下で，組み替えアデノウイルスを用いてＥＢＶに感染した腫瘍細胞（ＥＢＶが被感染細胞に特有の抗原を呈させるので，この抗原を手掛かりとして誘導されるプロモーターを用いる。）中で単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ遺伝子（ｔｋ），大腸菌のβ－ガラクトシターゼ遺伝子（βｇａｌ）やクロラムフェニコールアセチルトンスフェラーゼ遺伝子（ＣＡＴ）を発現させることにすぎず，引用例１中には，腫瘍細胞中でＨ１９遺伝子を導入・発現させることや，かかる発現を引き起こすためにＨ１９プロモーター，エンハンサーを用いることや，Ｈ１９遺伝子の調節 ＣＡＴ）を発現させることにすぎず，引用例１中には，腫瘍細胞中でＨ１９遺伝子を導入・発現させることや，かかる発現を引き起こすためにＨ１９プロモーター，エンハンサーを用いることや，Ｈ１９遺伝子の調節配列を用いてベクターを作成し，これを癌治療に用いることは記載も示唆もされていない。 また，膀胱癌はウイルス感染によって発症する疾患ではないから，アデノウイルスを感染させる引用発明１を膀胱癌に適用することは困難である。 ウ引用例３は，胎児組織及び胎児組織由来の小児腫瘍及び成人の腫瘍におけるＨ１９遺伝子のｍＲＮＡの発現を調べた研究に係るものにすぎないところ，同引用例には，Ｈ１９ＲＮＡが胎生期にＨ１９遺伝子を発現していた組織内で形成される腫瘍で再度発現すること，特定の腫瘍の腫瘍マーカーとして有用である可能性があることが記載されているにとどまる。いったんｍＲＮＡ転写酵素が結合して遺伝子の転写が開始されたからといって，技術常識上，同種遺伝子，異種遺伝子の別に関わらず発現活性を示すことになるものではない。尿管移行上皮癌においてＨ１９ｍＲＮＡの豊富な発現が見られたとしても，Ｈ１９プロモーターが膀胱癌細胞で異種遺伝子の発現に十分な活性を示したことになるものではない。そうすると，引用例３には，Ｈ１９遺伝子の調節配列を用いてベクターを作成し，これを癌治療に用いることについては記載も示唆もされていない。 - 9 -引用例４も，Ｈ１９遺伝子の５’隣接領域（ドメイン）の遺伝子配列を開示するものにすぎず，この遺伝子配列を癌治療に用いることはもちろん，この遺伝子配列を導入遺伝子を発現させるために用いることについても，記載も示唆もされていない。 引用例５も，Ｈ１９遺伝子の５’隣接領域（ドメイン）のうちのプロモータードメイン及び３’隣接領域のうちの２つのエンハンサー 入遺伝子を発現させるために用いることについても，記載も示唆もされていない。 引用例５も，Ｈ１９遺伝子の５’隣接領域（ドメイン）のうちのプロモータードメイン及び３’隣接領域のうちの２つのエンハンサードメインを開示し，同エンハンサーが組織特異的で，肝細胞以外の例えば筋細胞でＨ１９遺伝子を発現させるためには他の調節因子が必要である旨を開示するに止まり，Ｈ１９プロモーターやエンハンサーを導入遺伝子を発現させるために用いることや，Ｈ１９プロモーターやエンハンサーを癌治療に用いることは記載も示唆もされていない。むしろ，引用例５には，Ｈ１９遺伝子の３'隣接領域中のエンハンサーが子宮頸癌細胞（ＨｅＬａ細胞）では遺伝子発現増強効果を示さなかったことや，Ｈ１９エンハンサーが肝腫瘍細胞ＨｅｐＧ２では肝腫瘍細胞Ｈｅｐ３Ｂの場合と異なって不活性であること（等しく肝腫瘍細胞であるにもかかわらず，活性の有無が異なる。）や，外因性Ｈ１９遺伝子の肝腫瘍細胞ＨｅｐＧ２における転写不全は，Ｈ１９エンハンサーの不活性が原因であることが記載されており，Ｈ１９遺伝子の調節配列を用いてベクターを作成し，これを癌治療に用いることに対して，消極的な記載があるといえる。 引用例６も，Ｈ１９遺伝子に係るゲノミック・インプリンティングの機序及び因果関係を明らかにするために，Ｈ１９プロモーターをメチル化してプロモーターの活性がどの程度抑制されるかを明らかにするためのものにすぎず，Ｈ１９プロモーターを導入遺伝子を発現させるために用いることや，Ｈ１９プロモーターを癌治療に用いることは記載も示唆もされていないし，Ｈ１９プロモーターを用いて導入遺伝子を発現させるために，Ｈ１９プロモーターの活性をどのようにすべきかについても記載されていない。引用例６には，ゲノミック・インプリンティングに関与するＨ１ ないし，Ｈ１９プロモーターを用いて導入遺伝子を発現させるために，Ｈ１９プロモーターの活性をどのようにすべきかについても記載されていない。引用例６には，ゲノミック・インプリンティングに関与するＨ１９プロモーターの４６個のＣｐＧのうち３個のＣｐＧをメチル化しただけで，Ｈ１９プロモーターの活性が完全に抑制されることや，後記のとおりＨ１９プロモーターが細胞型に特異的に作用すること等が記載されているが，これはＨ１９遺伝 - 10 -子の調節配列を用いてベクターを作成し，これを癌治療に用いることに対して，消極的に働くものである。 これらのとおり，引用例３ないし６においては，Ｈ１９プロモーターやＨ１９エンハンサーが膀胱腫瘍細胞で導入遺伝子を高度に発現させる能力があることや，Ｈ１９遺伝子の調節配列を用いてベクターを作成し，これを癌治療に用いることは記載も示唆もされていない。 しかるに，審決は，Ｈ１９プロモーターが導入遺伝子を発現しなかった例や，Ｈ１９エンハンサーが不活性であった例等に関する記載を無視し，Ｈ１９遺伝子の調節配列が活性を示す例のみを引き合いにして，相違点(i)に係る構成の容易想到性を肯定したものであって，審決の判断には誤りがある。 エ引用例５の具体例１，２（４７０９頁図１にいう遺伝子構築物３，４（レーン３，４），４７１０頁図２にいう遺伝子構築物２（レーン２））は，細胞内でもともと内因性のＨ１９遺伝子が発現している肝腫瘍細胞Ｈｅｐ３Ｂに，Ｈ１９遺伝子，Ｈ１９プロモーター，Ｈ１９エンハンサーを含む遺伝子構築物を組み込んで，Ｈ１９ｍＲＮＡの発現レベルを確認したものにすぎない。そうすると，上記遺伝子構築物がＨ１９ｍＲＮＡをかなり多く産生しているとしても，Ｈ１９プロモーターが，膀胱腫瘍細胞において異種配列たる導入遺伝子を発現できるほど，高 現レベルを確認したものにすぎない。そうすると，上記遺伝子構築物がＨ１９ｍＲＮＡをかなり多く産生しているとしても，Ｈ１９プロモーターが，膀胱腫瘍細胞において異種配列たる導入遺伝子を発現できるほど，高効率で活性化できるかは明らかでなく，かかる活性化を内容とする本願発明１の技術的課題の解決に対して何ら示唆を与えるものではない（むしろ，引用例５に接した当業者は，少なくとも内因性のＨ１９遺伝子を発現している腫瘍細胞でないと，Ｈ１９プロモーターで導入遺伝子（外因性のＨ１９遺伝子）を発現させることができないと理解する。）。また，同引用例の具体例３（４７１３頁図６の遺伝子構築物３，５）も，ＡＦＰ遺伝子，ＡＦＰプロモーター，Ｈ１９エンハンサーを含む遺伝子構築物や，Ｈ１９遺伝子，Ｈ１９プロモーター，Ｈ１９エンハンサーを含む遺伝子構築物を肝腫瘍細胞Ｈｅｐ３Ｂに組み込んで，ＡＦＰ遺伝子やＨ１９遺伝子の発現レベルを調査したものにすぎない。前記のとおり，ＡＦＰプロモーターの活性は低いから， - 11 -ＡＦＰプロモーターとＨ１９プロモーターとの間で，遺伝子の転写量（発現量）を比較したところで，生体での（invivo）治療に適用できるほど，Ｈ１９プロモーター，エンハンサーが十分に活性を有するか否かは明らかにならない。むしろ，４７１３頁図６の遺伝子構築物２，５（ライン２，５）に係る記載からは，肝腫瘍細胞Ｈｅｐ３Ｂにおける遺伝子発現量は，ＡＦＰプロモーターとＨ１９プロモーターとでほとんど差がなく，したがってその活性にほとんど差がないことが推認できる。 そうすると，同引用例の具体例１ないし３から，当業者において，Ｈ１９プロモーターが遺伝子治療に用いることができるほど高効率で活性化されることを知ることはできない。したがって，「このＨ１９遺伝子の発現を調節している配列即 の具体例１ないし３から，当業者において，Ｈ１９プロモーターが遺伝子治療に用いることができるほど高効率で活性化されることを知ることはできない。したがって，「このＨ１９遺伝子の発現を調節している配列即ちプロモーターは，α－フェトプロテインプロモーターと同様に，成人の癌細胞で優先的に発現させるよう機能する」（８頁），「Ｈ１９遺伝子のプロモーターが高効率で活性化されることは，本件優先日前，既に公知となっていた文献より，当業者は知り得たことである。」（１２頁）との審決の判断には誤りがある。 また，前記のとおり，引用例５には膀胱腫瘍細胞に関する記載がなく，引用例５からは，組織特異的であるＨ１９エンハンサーに膀胱腫瘍細胞で活性（増強効果）があるのか，不活性であるのか，Ｈ１９遺伝子の発現にはさらに別の調節因子が必要なのか不明であって，引用例５の記載はＨ１９遺伝子の調節配列を膀胱腫瘍細胞に対して使用することの動機付けとなり得るものではなく，むしろ，当業者は引用例５の記載を見て上記使用を躊躇するから，かかる使用に対する阻害要因となる。 なお，引用例３でも，膀胱腫瘍細胞（株）の一部が内因性のＨ１９遺伝子を発現していることが記載されているにすぎないから，Ｈ１９プロモーターによる標的癌細胞での選択的な活性化（示差的活性化）を介して効果的な膀胱癌（腫瘍）治療ができるか否かは不明である。したがって，「Ｈ１９プロモーター及び／又はＨ１９エンハンサーが，成人の標的癌細胞で高度に，優先的に又は排他的に発現させ，他方，成人の正常細胞（非疾患細胞）で発現させない調節能力があることは，本件優先日前既に公知となっていた文献に基づいて，当業者は容易に予測することができたこ - 12 -とである。」（１２頁）との審決の判断にも誤りがある。 オ結局，審決がした相違点(i)に係る 本件優先日前既に公知となっていた文献に基づいて，当業者は容易に予測することができたこ - 12 -とである。」（１２頁）との審決の判断にも誤りがある。 オ結局，審決がした相違点(i)に係る構成の容易想到性判断には誤りがある。 (2)ア引用例３中には，膀胱癌が記載されているものの，多数の種類の腫瘍から標的として膀胱癌を選択することは示唆されていない。また，引用例６は，遺伝子がインプリンティングされる機序について記載したものにすぎず，他の引用例と組み合わせる動機付けがない。そして，引用例４ないし６は，膀胱癌の治療を目的とするものではなく，本願発明１の目的とは全く異なる。そうすると，引用発明１に引用例３ないし６に記載された発明を適用する動機付けに欠けるか，適用したとしても，当業者において相違点(ii)に想到することが容易でない。 イ引用例３の表１中には，膀胱癌においてＨ１９遺伝子が発現している旨の記載があるが，同表でＨ１９遺伝子が発現しているとされる腎臓のウィルムス腫瘍（Wilm'stumour）に係るＧ４０１細胞についても，引用例６ではＨ１９プロモーターによるＣＡＴ（クロラムフェニコール・アセチルトランスフェラーゼ）レポーター遺伝子の発現（ＣＡＴ発現）が見られなかった（肝腫瘍に係るＨｅｐ３Ｂ細胞でのみＣＡＴ発現が見られた。なお，引用例６では，Ｇ４０１細胞は内因性のＨ１９遺伝子を発現していないが，Ｈｅｐ３Ｂ細胞は内因性のＨ１９遺伝子を高レベルで発現しているとされている。）。したがって，仮にある腫瘍組織（腫瘍細胞）でＨ１９遺伝子が発現することがあるとしても，必ずしもＨ１９プロモーターで導入遺伝子を発現させることができるわけではない（組織ないし細胞型に特異的な作用）。 なお，表１の腫瘍欄の記載は，悪性度の進行に伴ってＨ１９遺伝子を発 ることがあるとしても，必ずしもＨ１９プロモーターで導入遺伝子を発現させることができるわけではない（組織ないし細胞型に特異的な作用）。 なお，表１の腫瘍欄の記載は，悪性度の進行に伴ってＨ１９遺伝子を発現している腫瘍細胞の割合が大きくなることを示すだけで，腫瘍細胞のＨ１９遺伝子の発現量が悪性度の進行に伴って増加するということはできない。 引用例５には，肝腫瘍細胞のうちＨｅｐ３ＢではＨ１９エンハンサーが活性であるが，ＨｅｐＧ２では不活性であること等が記載されており，肝腫瘍細胞のうちでも活性の有無が分かれているほどであるから，腫瘍細胞（株）の種類によって，導入遺伝子の発現のレベルが異なることは明らかである（組織特異的）。当業者が引用 - 13 -例５に接したとしても，導入遺伝子を癌治療に利用できるほど高レベルで発現させるためには，Ｈ１９プロモーター，Ｈ１９エンハンサー及び適用する腫瘍細胞の組合せを，多くの試行錯誤を経てなお探求する必要があるのであって，当業者がかような組合せに想到することは容易でない。のみならず，引用例５中には，膀胱腫瘍細胞に関する記載がないから，膀胱腫瘍細胞に対する適用の可否が不明である。 引用例６の１１９頁図５でも，後記のとおり，Ｈ１９プロモーターが単純ヘルペスウイルス由来（ＴＫ）プロモーターよりも低い発現活性を有するにすぎないことが示されているにすぎない。 標的となる腫瘍細胞として膀胱腫瘍細胞を選択する動機付けとなるべき記載はいずれの引用例中にもなく，Ｈ１９プロモーターやＨ１９エンハンサーが膀胱腫瘍細胞で高度に導入遺伝子を発現させる能力がある旨の記載はいずれの引用例中にもない。したがって，引用例に記載された事項をヒト癌細胞一般にまで拡大して，「該腫瘍細胞として，膀胱癌細胞または膀胱癌を選択することも，当業者が容易にな 現させる能力がある旨の記載はいずれの引用例中にもない。したがって，引用例に記載された事項をヒト癌細胞一般にまで拡大して，「該腫瘍細胞として，膀胱癌細胞または膀胱癌を選択することも，当業者が容易になし得たことである。」（８頁），「Ｈ１９プロモーター及び／又はＨ１９エンハンサーが，・・・膀胱癌細胞で高度に，優先的に又は排他的に発現させ，・・・ることは，本件優先日前既に公知となっていた文献に基づいて，当業者は容易に予測することができたことである。」（１２頁）との審決の判断には誤りがある。 ウ結局，審決がした相違点(ii)に係る構成の容易想到性判断には誤りがある。 (3) 前記のとおり，Ｈ１９エンハンサーは腫瘍組織の別に応じて活性を有し（組織特異的），本件優先日当時，Ｈ１９遺伝子の調節配列を利用したベクターが膀胱癌の治療に効果があるかは不明であった。本願発明１の発明者は，Ｈ１９プロモーター，Ｈ１９エンハンサーを含む調節配列により，腫瘍細胞を傷害し得る異種配列（導入遺伝子）を発現させるベクターが，膀胱癌の治療に効果を有するという知見を初めて見出したのであって，かかる作用効果は引用例からは予測し得ない格別顕著なものである。 すなわち，本件優先日の後においてすら，大部分の腫瘍特異的プロモーターの活 - 14 -性が低いというのが当業者の技術常識であったのに，Ｈ１９プロモーターは，本件優先日ころ当時において強力なプロモーターとして公知のＳＶ４０，ＣＭＶに匹敵するか，又はより高い活性を有している。引用例６の図５には，ＴＫプロモーターの遺伝子構築物（ｐＴＫ）の方がＨ１９プロモーターの遺伝子構築物（ｐＨ１９）よりもＣＡＴ活性が高いことが記載されているから（前者の方が後者よりもバンドが大きく，より濃い。），同図に接した当業者であれば，Ｈ１９プロモータ Ｋ）の方がＨ１９プロモーターの遺伝子構築物（ｐＨ１９）よりもＣＡＴ活性が高いことが記載されているから（前者の方が後者よりもバンドが大きく，より濃い。），同図に接した当業者であれば，Ｈ１９プロモーターは，多くの細胞腫において低ないし中程度の発現活性しか有しないＴＫプロモーターよりも活性が低いものと認識するはずであるが，実際には，生体で導入遺伝子（外来遺伝子）を発現させることができ，さらに生体で癌治療が可能なほど活性（発現効率）が高かったのであって，当業者が引用例からかかる顕著な効果を見出すことは困難である。 また，引用例５，６の記載からは，Ｈ１９プロモーターが導入遺伝子を発現させることができるのは，内因性のＨ１９遺伝子が発現している細胞（株）に限られるとも推測されるところ，本願発明１の発明者は，膀胱腫瘍胞株を用いて実験し，内因性のＨ１９遺伝子が発現していないＥＪ２８，Ｔ２４Ｐ，ＵＭ－ＵＣ－３等でも導入遺伝子を発現させることに成功し，肝腫瘍細胞の場合とは全く異なる成果を得たのであって，膀胱癌と肝臓癌とを同視して本願発明１の予想外の顕著な効果を看過した審決の進歩性判断には誤りがある。 なお，原告は審判の段階で参考資料を提出して本願発明１の顕著な効果を説明したが，審決は出願後に公表された論文等であるとしてこれらを参酌しなかった。本願明細書には本願発明１のベクターが奏する効果を認識できる記載がされているから，上記参考資料を参酌しなかった審決は誤りである。すなわち，審判での参考資料１，２，４，１０（甲１０，１１，１３，１９）によれば，ジフテリア毒素（ＤＴ－Ａ）に機能的に連結されたＨ１９調節配列を含む本願発明１のベクターは，膀胱癌治療に対して格別顕著な優れた効果を奏するとともに，副作用が見られず安全性が高いということができる。 - 15 Ｔ－Ａ）に機能的に連結されたＨ１９調節配列を含む本願発明１のベクターは，膀胱癌治療に対して格別顕著な優れた効果を奏するとともに，副作用が見られず安全性が高いということができる。 - 15 -結局，本願発明１は引用発明１等からは予測することができない格別有利な作用効果を奏するのであって，これを看過して本願発明１の進歩性を否定した審決の判断には誤りがある。 第４ 取消事由に対する被告の反論 １ 取消事由１に対し(1) 原告は，本願発明１の「調節配列」があたかもＨ１９エンハンサーに限定されるかのように主張するが，本願発明１の「調節配列」にはＨ１９プロモーターを単独で使用する態様が含まれるから，Ｈ１９エンハンサーを使用する態様に限定されない。したがって，本願明細書でＨ１９エンハンサーが膀胱腫瘍細胞に対して活性を有することが開示されているとしても，引用発明１の「発現シグナル」が本願発明１の「調節配列」に相当するとして誤りはない。 また，仮に本願発明１の「調節配列」がＨ１９エンハンサーを意味するとしても，一般にエンハンサーがプロモーターと協働して遺伝子の転写を活性化させるという周知の遺伝子学的知見及び引用例３，５の記載に照らせば，当業者が膀胱腫瘍細胞に対しＨ１９プロモーターに加えＨ１９エンハンサーを利用することは容易になし得ることであるから，引用発明１の「発現シグナル」が本願発明１の「調節配列」に相当するとして誤りはない。引用例３の表では膀胱腫瘍細胞でＨ１９遺伝子が発現することが示されているから，Ｈ１９エンハンサーが組織特異的で，肝腫瘍細胞ＨｅｐＧ２等で機能せず，内因性のＨ１９遺伝子を発現しないとしても，当業者がＨ１９エンハンサーを利用することは何ら妨げられないし，引用例５の図６でも，Ｈ１９プロモーターをＡＦＰエンハンサーやＨ 細胞ＨｅｐＧ２等で機能せず，内因性のＨ１９遺伝子を発現しないとしても，当業者がＨ１９エンハンサーを利用することは何ら妨げられないし，引用例５の図６でも，Ｈ１９プロモーターをＡＦＰエンハンサーやＨ１９エンハンサーと組み合わせて機能させ，Ｈ１９遺伝子を発現させることが示されているから，Ｈ１９エンハンサーの利用の着想に至ることも容易で，その効果も示されているからである。 (2) 本願発明１の特許請求の範囲では，単に「ベクター」と特定されているのみでウイルスベクターも含まれるから，本願発明１の「ベクター」が非ウイルスベ - 16 -クターであることを前提とする原告の主張は失当である。また，本願発明１では作用機序等に係る特定がされていないし，甲第１号証の請求項１１がウイルス感染によって呈される特有の核抗原を利用してプロモーターを誘導するものであるとしても，引用発明１（甲１の請求項１）は，核抗原を利用するものではないから，作用機序等の相違をいう原告の主張は失当である。 (3) 結局，審決がした一致点の認定に誤りはなく，相違点の看過も存しない。 ２ 取消事由２に対し(1)ア当業者であれば，所望の特性を有するプロモーターがあれば，必要な活性を示すか否か，その使用の可否を検討するものであり，ある遺伝子のプロモーターが実際に治療に使えるほどに導入遺伝子を発現できるような高活性なプロモーターであるとは限らなくても，それが腫瘍細胞で特異的に発現していれば，その使用を躊躇するものではない。いったんｍＲＮＡ転写酵素がプロモーターに結合して遺伝子の転写が開始されれば，その対象が同種の遺伝子であるか異種の遺伝子であるかにかかわらず，発現活性を示すことは当業者の技術常識である。引用例３の表１等では，Ｈ１９遺伝子が腫瘍細胞で特異的に発現することが記載されてお れれば，その対象が同種の遺伝子であるか異種の遺伝子であるかにかかわらず，発現活性を示すことは当業者の技術常識である。引用例３の表１等では，Ｈ１９遺伝子が腫瘍細胞で特異的に発現することが記載されており，Ｈ１９プロモーターが機能していた（十分な発現活性を示した）ことは明らかであるから，当業者がその調節配列の使用を検討することに何ら論理的無理はない。 Ｈ１９遺伝子は癌（腫瘍）で特異的に発現するものである一方，必ずしも癌の全てにおいて発現するというわけではないことは，引用例３の表３にあるとおり，既に知られている事項である。当業者が癌の治療にＨ１９調節配列を利用しようとするときは，まずはＨ１９遺伝子の発現している癌を治療の対象とするのが通常である。導入遺伝子発現において非常に重要な要素であるプロモーターが機能しているという事実は，膀胱腫瘍細胞において導入遺伝子を発現させる上でＨ１９プロモーターに対する興味を抱かせるものであって，当業者の興味を何ら阻害するものではない。Ｈ１９遺伝子の発現が見られない癌や腫瘍細胞ＨｅｐＧ２，Ｇ４０１があるとしても，Ｈ１９調節配列を利用することは何ら阻害されない。審決がＨ１９遺伝 - 17 -子が発現しなかった例として，ＨｅｐＧ２やＧ４０１を認定しなかったとしても，進歩性判断の結論に影響するものではない。 イ原告は，ＡＦＰプロモーターやＣＥＡプロモーターの活性が低く，生体内での抗腫瘍効果を示した研究成果はほとんど存在しなかったなどと主張するが，原告が提出する甲第３２ないし第３５号証は本件優先日以後に公知となった文献にすぎず，本件優先日当時，一般に腫瘍特異的プロモーターの発現活性が低かったことが当業者の技術常識であったとはいえない。当業者において，従来の腫瘍特異的プロモーターよりも発現活性が高くなければ遺伝子治 すぎず，本件優先日当時，一般に腫瘍特異的プロモーターの発現活性が低かったことが当業者の技術常識であったとはいえない。当業者において，従来の腫瘍特異的プロモーターよりも発現活性が高くなければ遺伝子治療への使用をしなかったとの事情はなく，ＡＦＰプロモーターやＣＥＡプロモーターでさえ，癌に対する遺伝子治療への使用が検討されているのであって（甲２２），当業者が本件優先日前に公知のＨ１９プロモーターについて，条件次第で癌の遺伝子治療に使用できる可能性に期待して，その使用を試みることは当然である。なお，ＡＦＰプロモーターによる導入遺伝子の発現がＡＦＰを過剰発現している腫瘍に制限されるとしても，ＡＦＰが腫瘍細胞でのみ発現していることに変わりはないから，ＡＦＰプロモーターによる導入遺伝子の発現が正常細胞では行われず成人の腫瘍細胞で優先的に行われていることは否定されない。 ウ審決は，Ｈ１９遺伝子の発現を調節するＨ１９プロモーターが本件優先日前に公知であることを示すために引用例５を引用したものにすぎず，Ｈ１９エンハンサーの活性の有無とは関係がない。また，前記のとおり，本願発明１の「調節配列」にはＨ１９プロモーターのみの態様のものも含まれるから，Ｈ１９エンハンサーの活性に関する原告の主張は，特許請求の範囲の記載に基づかないものにすぎない。 引用例６では，好ましい作用効果を奏するプロモーターとしてＴＫ（チミジンキナーゼ）プロモーターが取り扱われているところ（正の対照例），図５Ａでは，Ｈ１９プロモーターが肝腫瘍細胞Ｈｅｐ３ＢにおいてＴＫプロモーターと同等か，ＴＫプロモーターよりもやや低い発現活性を示すことが記載されている。したがって， - 18 -引用例６の記載は，Ｈ１９プロモーターを採用する動機になりこそすれ，これを阻害する事由になるものではない。 プロモーターよりもやや低い発現活性を示すことが記載されている。したがって， - 18 -引用例６の記載は，Ｈ１９プロモーターを採用する動機になりこそすれ，これを阻害する事由になるものではない。 エ本願発明１の特許請求の範囲では，Ｈ１９遺伝子が内因性か外因性か特定されていないから，内因性のＨ１９遺伝子を発現していない腫瘍細胞でも導入遺伝子を発現させることができたかどうかは，特許請求の範囲の記載に基づかないものにすぎない。また，審決は，内因性のＨ１９遺伝子を発現する膀胱癌，膀胱腫瘍細胞について，本願発明１の容易想到性を肯定したものであって，その判断に誤りはない。 オ Ｈ１９プロモーターがプロモーターＳＶ４０やＣＭＶよりもさらに高活性であることを裏付ける証拠はなく，本願明細書の実施例６の記載からはＨ１９プロモーターの活性はＳＶ４０よりも低いことが窺われる（Ｈ１９エンハンサーを使用せず，Ｈ１９プロモーターのみを利用した場合で，ＳＶ４０の数分の１程度）。本願明細書には，Ｈ１９プロモーターがＣＭＶよりも高活性であることが記載も示唆もされていない。本件出願後に公表された文献にすぎず，参酌できない甲第１７号証においても，正常組織でも常時（constitutive）発現させるプロモーターＣＭＶよりも，腫瘍特異的に発現させるＨ１９プロモーターの方が有利であることが示されているにすぎず，Ｈ１９プロモーターがＣＭＶよりも高活性であることは記載されていない。そうすると，当業者の予測に反してＨ１９プロモーターがＳＶ４０やＣＭＶよりもさらに高活性である旨の原告の主張は理由がない。 また，そもそも本願明細書中に生体内（インビボ）での格別顕著な効果が記載されているとはいえないが，本願発明１は生体内での使用に限定されたものではなく，試験管内での使用（インビトロ 張は理由がない。 また，そもそも本願明細書中に生体内（インビボ）での格別顕著な効果が記載されているとはいえないが，本願発明１は生体内での使用に限定されたものではなく，試験管内での使用（インビトロ）も含むものであるし，生体内でプロモーターが機能しない現象（サイレンシング）が起きるとしても，本願発明１の進歩性判断に何ら影響しない。そもそも，本件優先日当時，サイレンシングが当業者に広く知られていたとはいえないし，上記当時，既に，プロモーターを利用して導入遺伝子を発現させる技術は当業者の常套手段になっていたから，上記当時，仮に生体内でサイ - 19 -レンシング等により所望の結果が得られない可能性があったとしても，当業者はＨ１９プロモーターを用いて導入遺伝子を発現させることを試みたはずである。 カ従来，癌（腫瘍）に対して毒性遺伝子を導入して，腫瘍（癌）細胞を殺そうというアイデアが生まれたが，腫瘍細胞だけでなく正常細胞にも毒性遺伝子が導入されれば，正常細胞も死に至ることになる。しかし，腫瘍細胞において特異的に働く調節配列を用いれば，腫瘍細胞では毒性遺伝子が発現し，腫瘍細胞は死に至るが，正常細胞では毒性遺伝子の発現は抑制され，死なないことになる。引用例１はこのような手法を利用した本件優先日前に公知の技術であるところ，審決は，腫瘍細胞とＨ１９遺伝子発現の活性化との関連が引用例３に記載され，またＨ１９プロモーター領域が引用例４ないし６に記載されていることから，上記公知技術の毒性遺伝子の調節配列として，「Ｈ１９遺伝子の発現を調節しているプロモーターを用いることは，当業者が容易に想到し得ることである。そして，該Ｈ１９遺伝子のプロモーターは・・・当業者が容易に利用できるものに過ぎない」としたものであって，審決の判断に誤りはない。 (2)ア審決 いることは，当業者が容易に想到し得ることである。そして，該Ｈ１９遺伝子のプロモーターは・・・当業者が容易に利用できるものに過ぎない」としたものであって，審決の判断に誤りはない。 (2)ア審決は，Ｈ１９遺伝子の発現を調節しているプロモーターが本件優先日前に既に公知であったことを示すために引用例４ないし６を引用したのであって，これらの引用例の技術的課題が膀胱癌の治療と異なることは，引用発明１への適用の動機付けを否定しない。 イ引用例３の表１の腎臓組織の「腫瘍」欄には「４／７ウィルムス腫瘍の芽体＋」と記載されており，ウィルムス腫瘍７つのうち４つでＨ１９遺伝子が発現し，３つで発現しなかったことが示されている。同じウィルムス腫瘍においてもＨ１９遺伝子が常に発現するわけではなく，発現する場合と発現しない場合があること自体は何ら不自然ではない。他方で，引用例３には，健康な成人の膀胱粘膜ではＨ１９遺伝子が発現しない一方，「膀胱癌＋」の「４／２４ステージⅠ，１３／２０ステージⅡ，１４／２４ステージⅢ」ではＨ１９遺伝子が発現していることが記載されており，正常な膀胱の細胞ではＨ１９遺伝子を発現しないが，癌を発症すると - 20 -Ｈ１９遺伝子を発現することが示されているから，Ｈ１９プロモーターが膀胱腫瘍細胞でＨ１９遺伝子を高度に発現させることは明らかである。 引用例５で言及されているヒト肝腫瘍細胞Ｈｅｐ３Ｂ以外であっても，内在性のＨ１９遺伝子が発現している細胞であれば，Ｈ１９プロモーターが機能していると推測できるから，引用例５の記載事項を少なくとも内在性のＨ１９遺伝子を発現している腫瘍細胞（癌細胞）にまで拡張することは可能である。 乙第４号証（P.Ohana ほか著「TheexpressionoftheH19 geneandits 性のＨ１９遺伝子を発現している腫瘍細胞（癌細胞）にまで拡張することは可能である。 乙第４号証（P.Ohana ほか著「TheexpressionoftheH19 geneanditsfunctioninhumanbladdercarcinomacelllines」，１９９９年（平成１１年）発行FEBSLettersVol.454，８１～８４頁）には，肝臓癌においてＨ１９エンハンサーが発現を上昇させることが記載されており，機能を発揮するに十分な長さのエンハンサー領域を使用すれば肝臓癌でも発現促進効果を奏することは明らかである。Ｈ１９エンハンサーの増強効果が肝臓癌と膀胱癌とで異なるという原告の主張は疑わしい。 ウ結局，「該腫瘍細胞として膀胱癌細胞または膀胱癌を選択することも，当業者が容易になし得たことである。」とした審決の相違点(ii)に係る構成の容易想到性判断に誤りはない。 (3) 本願当初明細書の実施例である９節（段落【００７７】，【００７８】）では，膀胱腫瘍モデルマウスにおけるＨ１９調節配列を使用した遺伝子療法の一般的な方法が記載されているにとどまり，マウスに実際に投与する際の具体的手法等について記載されていない。実験結果についても，「マウスの実験群内の膀胱腫瘍は，対照群内の膀胱腫瘍と比較し，腫瘍の大きさが減少し壊死する」という記載がなされているにとどまり，具体的な腫瘍の計測結果や壊死の状況は一切記載されておらず，実験結果を客観的に確認できない。そして，９節では，他の実施例には存在する「結果と考察」欄が記載されていない上に，他の実施例では過去形で実験結果が記載されているのとは対照的に，現在形で実験結果が記載されており，実際に実験が行われたか疑問である。原告が真に実験を行っていれば，容易にその結果を本願 れていない上に，他の実施例では過去形で実験結果が記載されているのとは対照的に，現在形で実験結果が記載されており，実際に実験が行われたか疑問である。原告が真に実験を行っていれば，容易にその結果を本願当初明細書に記載できたはずであって（P.Ohana ほか著「USEOFH19 REGULATORY - 21 -SEQUENCESFORTARGETEDGENETHERAPYINCANCER」，２００２年（平成１４年）発行Int.J.CancerVol.98，６４５～６５０頁，乙６参照），本願明細書の作用効果の記載（段落【００７８】）は，いわば願望を記載したものにすぎない。原告が参考文献として提出する文献がいずれも本件出願後のものであるのは，この証左である。かかる具体性を欠いた記載をもって発明の作用効果を開示したものとすることは，何らの実験による確認無しに，憶測のみで多数の可能性について特許出願し，出願後に確認を行い初めて効果があると判明した部分について，その後参考文献や実験成績証明書と称してデータを提出することにより特許権を取得することを許す結果となって，出願当初から十分な確認データを開示する第三者との間に著しい不均衡を生じ，先願主義の原則にも悖るし，発明の公開の代償として独占権を付与する特許制度の趣旨に反する。 したがって，審決に本願発明１の格別有利な作用効果の看過は存しない。 第５ 当裁判所の判断 １ 取消事由１（引用発明１と本願発明１との一致点及び相違点の認定の誤り）について(1) 本願明細書（甲７）の段落【００１５】には，「本明細書中に記載されているのは，異種コード配列の腫瘍細胞特異的な発現を指令するために使用できるＨ１９調節配列である。これらの調節配列には，上流のＨ１９プロモーター領域および／また ０１５】には，「本明細書中に記載されているのは，異種コード配列の腫瘍細胞特異的な発現を指令するために使用できるＨ１９調節配列である。これらの調節配列には，上流のＨ１９プロモーター領域および／または下流のＨ１９エンハンサー領域が含まれる。」との記載があるから，本願発明１の特許請求の範囲にいう「調節配列」が，細胞外から導入される遺伝子配列である異種コード配列（異種配列）を腫瘍細胞に特異的に発現させる指令をするために使用される配列であって，ベクター中に異種配列と機能的に連結され，ベクターが腫瘍細胞に導入された際に，腫瘍細胞内で当該異種配列の発現を指令するものであることが明らかである。 他方，引用例１（特表平９－５０４９５５号公報，甲１）の６頁には，「本発明は - 22 -実際に，腫瘍細胞中での選択的なある種の遺伝子の発現を指令することが可能なベクターを提供する。本発明は具体的には，転写制御のためのある種のシグナルは腫瘍細胞内で特異的に活性を示すこと（もしくは活性化される），およびそれらを異種遺伝子の選択的発現に用いることが可能であることの論証に基づいている。本発明は更に，アデノウイルスが腫瘍細胞内の治療用遺伝子の輸送および発現に特に有効なベクターを構築するという論証からの成果でもある。具体的にはアデノウイルスはそれらが感染する細胞のゲノム内には組み込まれないという利点，つまりその細胞内で非常に安定な様式で保持されるという利点を有しており，そのため持続性治療効果を取得し，かつ非常に広い宿主域を有することが可能であり，このことによりいずれかの種類の細胞にも影響を及ぼす腫瘍の治療への適用が可能となる。それに加えて組換えアデノウイルスを高力価で取得することが可能であり，このことにより高い感染多重度での作業，および細胞当たりの多コピーの異種遺伝 の細胞にも影響を及ぼす腫瘍の治療への適用が可能となる。それに加えて組換えアデノウイルスを高力価で取得することが可能であり，このことにより高い感染多重度での作業，および細胞当たりの多コピーの異種遺伝子の組込みが可能となる。本発明は更に，アデノウイルスタイプのウイルス類は，そのようなプロモーターを含む異種配列の組込み，それらの配列の腫瘍細胞内への転移，および特異的シグナルの制御下に置かれる所望される遺伝子の発現が直接腫瘍内で可能であるという論証にも基づいている。従って本発明の第一主題は，腫瘍細胞内で特異的に活性を示す発現シグナルの制御下に異種ＤＮＡ配列を含む欠損組換えアデノウイルスである。」との記載があるから，引用発明１のベクターも，腫瘍細胞で特異的（選択的）に活性を示す「発現シグナル」の制御下で，異種配列（異種ＤＮＡ配列）を発現させるものである。したがって，引用発明１にいう「発現シグナル」も，異種配列の発現を制御（指令）するものであって，ベクター中で異種配列と機能的に連結されているから，本願発明１にいう「調節配列」と果たす機能が共通である。 そうすると，「引用例１の・・・『腫瘍細胞内で特異的に活性を示す発現シグナル』は，本願発明１の（腫瘍細胞において配列を発現させる）『調節配列』に相当する。 そして，引用例１の・・・この異種ＤＮＡ配列は，発現シグナルである調節配列に機能的に連結されているといえる。さらに，引用例１の・・・『欠損組換えアデノウ - 23 -イルス』は，・・・『腫瘍細胞内で特異的に活性を示す発現シグナルの調節下に異種ＤＮＡ配列を含む』ものであり，・・・癌における遺伝子治療のための組換えベクターであるから，本願発明１の『腫瘍細胞において配列を発現させるためのベクター』に相当する。」とした審決の判断に誤りはなく，審決がした本願 む』ものであり，・・・癌における遺伝子治療のための組換えベクターであるから，本願発明１の『腫瘍細胞において配列を発現させるためのベクター』に相当する。」とした審決の判断に誤りはなく，審決がした本願発明１と引用発明１の一致点，相違点の認定に誤りはない。 (2) 原告は，ヒト肝腫瘍細胞株ＨｅｐＧ２では不活性であるＨ１９エンハンサーの膀胱癌における特性を考慮することなく，本願発明１にいう「調節配列」が引用発明１の「発現シグナル」に相当するとした審決の判断は誤りであると主張するが，前記(1)のとおり，本願発明１にいう「調節配列」と引用発明１の「発現シグナル」とはその機能が共通であるから，原告がいうＨ１９エンハンサーの特性を考慮しても，審決の判断に誤りがあるとはいえない。 また，原告は，本願発明１のベクターは非ウイルスベクターであり，引用発明１のアデノウイルスベクターとは，その作用機序も効果も異なるなどと主張する。しかしながら，本願明細書の段落【００４７】には，「細胞内への核酸のinvivo 導入のための好ましいアプローチは，Ｈ１９調節配列の制御下で特定の細胞障害性遺伝子といった核酸を含有するウイルスベクターを使用することによるものである。ウイルスベクターでの細胞の感染は，ターゲティングされた細胞の大部分が核酸を受理できるという利点をもつ。さらに，例えば，ウイルスベクター内に含まれたｃＤＮＡによりウイルスベクター内でコードされた分子は，ウイルスベクターの核酸を取込んだ細胞の中で効率良く発現される。ここで開示されている方法及び組成物を用いて送達され得る適切なベクターとしては，単純ヘルペスウイルスベクター，アデノウイルスベクター，アデノ関連ウイルスベクター，レトロウイルスベクター，仮性狂犬病ウイルス，アルファヘルペスウイルスベクターなどが含まれ る適切なベクターとしては，単純ヘルペスウイルスベクター，アデノウイルスベクター，アデノ関連ウイルスベクター，レトロウイルスベクター，仮性狂犬病ウイルス，アルファヘルペスウイルスベクターなどが含まれるが，これらに制限されるわけではない。」との記載があるから，本願発明１においてもウイルスをベクターとする構成が含まれることは明らかで，例えばプラスミドといった非ウイルスベクターを前提とする原告の上記主張は失当である。なお，引用例１の１ - 24 -０頁には，「既述のようにこの異種ＤＮＡ配列は，腫瘍細胞中で特異的に活性を示す発現シグナルの制御下に置かれる。このような様式では，用いられる遺伝子は，そのウイルスが実際に腫瘍細胞を感染した場合にのみ発現され，かつその効果を生じる。本発明の好ましい態様ではそれらの配列は，腫瘍の原因となるかもしくは腫瘍に関連するウイルスの存在により誘導されるかもしくはその存在下で活性を示す発現シグナルである。エプスタイン－バール（Epstein-Barr）ウイルス（ＥＢＶ）もしくはパピローマウイルスにより誘導可能な発現シグナルを本発明の構造内で用いることが更に一層好ましい。」との記載があり，１１頁には，ＥＢＶウイルスやパピローマウイルスのプロモータに関する記載に続けて，「これらのプロモーターは正常細胞中では不活性であり，かつ腫瘍細胞では活性を示す発現シグナルであってもよい。 具体的には，α－フェトプロテインプロモーター（・・・），もしくはＩＧＦ－ⅡのＰ３プロモーター（・・・）は肝臓癌の場合においてのみ成人に活性を示し，これらを本発明の構成内で使用することが可能である。ホルモン依存性もしくはホルモン関連性腫瘍（例えば，乳癌もしくは前立腺癌）の場合においては，ホルモンにより誘導されるプロモーターを使用することも可能である を本発明の構成内で使用することが可能である。ホルモン依存性もしくはホルモン関連性腫瘍（例えば，乳癌もしくは前立腺癌）の場合においては，ホルモンにより誘導されるプロモーターを使用することも可能である。」との記載があるから，引用例１においては「発現シグナル」として使用可能なものが種々記載されているということができ，引用例１がウイルス感染が発症の原因となったり，ウイルスが発症に関連するタイプの腫瘍（癌）のみを対象として解決手段を提供したりするものということはできないし，腫瘍を傷害する戦略や作用機序等の相違ゆえに前記(1)の結論が左右されるものではない。 ２ 取消事由２（相違点に係る構成の容易想到性の判断の誤り）について(1)ア癌についての一般的な文献である横田淳編「癌化のメカニズムを解く」（１９９８年（平成１０年）１０月株式会社羊土社発行，甲３７）には，「癌遺伝子治療の戦略」の「ａ）自殺遺伝子治療」につき，「ＨＳＶ－ｔＫ，シトシンデアミナーゼ（ＣＤ），ＶＳＶ－ｔＫなどを癌細胞に導入し，後にその遺伝子によって活性化される細胞傷害性プロドラッグを投与して癌細胞を死滅させようとする戦略が自殺 - 25 -遺伝子治療である。主に，脳腫瘍，卵巣腫瘍などに用いられているが，今のところ効果は一時的であって，延命につながったという報告はなされていない。」（１１３，１１４頁）との記載があり，また「今後の課題」の「２）癌特異的遺伝子発現」につき，「癌細胞でのみ発現させるような工夫がなされれば，それは代替案となりうる。 実際，αｆｅｔｏタンパク質のプロモーターを目的とする遺伝子に結合させると，同タンパク質を発現している肝癌細胞でのみ遺伝子が発現することが報告されている。同様なことはＣＥＡプロモーターを使っても検討されている。しかし，こういった癌特異的 を目的とする遺伝子に結合させると，同タンパク質を発現している肝癌細胞でのみ遺伝子が発現することが報告されている。同様なことはＣＥＡプロモーターを使っても検討されている。しかし，こういった癌特異的プロモーターは，ほかのプロモーターに比べて一般に活性が低いために，いずれも臨床応用までには至っていない。」（１１９，１２０頁）との記載があり，「３）発現の増強」につき，「単に癌細胞において特異的に遺伝子が発現されるのみならず，十分な活性として遺伝子が発現される必要がある。例えば，自殺遺伝子，ＨＳＶ－ｔＫ遺伝子はタンパク質量として十分に発現していなければ細胞を傷害するに至らないとされている」（１２０頁）との記載がある。また，癌研究に係る文献であるキジマタカシほか著「ApplicationoftheCreRecombinase/loxPSystemFurtherEnhancesAntitumorEffectsinCellType-specificGeneTherapyagainstCarcinoembryonicAntigen-producingCancer」（１９９９年（平成１１年）１０月発行CANCERRESEARCH５９巻，甲３９）にも，「Aconsiderablenumberofstudiesofcancerhaveshownthatthecelltype-specificpromoterisaneffectivetoolforselectiveexpressionofforeigngenesintumorcells. However, fewreportshavedemonstratedsignificantinvivoantitumoref reigngenesintumorcells. However, fewreportshavedemonstratedsignificantinvivoantitumoreffectsusingthisstrategythusfar, possiblybecausethelowactivityofsuchapromoterresultsininsufficientexpressionofgenesincancercellsaswellasininsignificantantitumoreffects, evenwhenthecellsareinfectedbyhighlyefficientgenetransfermethods. Toovercomethisproblem, weusedtheCre/loxPsystemforthecelltype-specificgenetherapyagainstcarcinoembryonicantigen (CEA)-producingcancer.」（相当な数の癌に関する研究が，細胞型特異的プロモーターが腫瘍細胞における外来遺伝子の選択的発現に効果的な道具であることを示している。しかしながら，現 - 26 -在までに，たとえ細胞が高効率な遺伝子導入法によって感染された場合でさえも，この戦略を用いて十分なインビボでの抗腫瘍効果を示した報告はほとんどない。これはおそらくそのようなプロモーターの低い活性が，腫瘍細胞中での不十分な遺伝子発現および不十分な抗腫瘍効果という結果を生じさせるためである。この問題を克服するために，我々はＣｒｅ／ｌｏｘＰシステムをＣＥＡ産生腫瘍に対する プロモーターの低い活性が，腫瘍細胞中での不十分な遺伝子発現および不十分な抗腫瘍効果という結果を生じさせるためである。この問題を克服するために，我々はＣｒｅ／ｌｏｘＰシステムをＣＥＡ産生腫瘍に対する細胞型特異的遺伝子治療のために使用した。）との記載（４９０６頁）がある。そして，遺伝子治療の概況に係る一般的な文献であるInderM. Verma ほか著「Genetherapy-promises, problemsandprospects」（Nature３８９巻，１９９７年（平成９年）９月発行，甲４０）には，導入遺伝子発現の困難性について，次のとおりの記載がある。 ・２３９頁「Inprinciple, genetherapyissimple: ・・・Inpractice, considerableobstacleshaveemerged.」（原理上は，遺伝子治療は単純である：・・・現実には，相当数の障害が明らかになってきた。）「Buttheproblems - suchasthelackofefficientdeliverysystems, lackofsustainedexpression, andhostimmunereactions – remainformidablechallenges.Althoughmorethan 200 clinicaltrialsarecurrentlyunderwayworldwide, withhundredsofpatientsenrolled, thereisstillnosingleoutcomethatwecanpointtoasasuccessstory.」（しかしながら，効率的な遺伝子 enrolled, thereisstillnosingleoutcomethatwecanpointtoasasuccessstory.」（しかしながら，効率的な遺伝子送達システムの欠如，持続的な発現の欠如及び宿主の免疫反応といった問題が大変な課題として残っている。２００余例の臨床試験が現在のところ世界中で進行中であり，何百人という患者が登録済みであるが，我々が成功例であると指摘することのできるただ１つの結果すらない。）「TheAchillesheelofgenetherapyisgenedelivery, andthisistheaspectthatwewillconcentrateonhere. Thusfar, theproblemhasbeenaninabilitytodelivergenesefficientlyandtoobtainsustainedexpression.」（遺伝子治療の弱点は遺伝 - 27 -子送達であり，そして，それが我々にここで焦点を当てようとしている特徴である。現在まで，問題は遺伝子を効率的に送達すること及び持続的な発現を得ることが不可能であることである。）「Mostoftheseapproachessufferfrompoorefficiencyofdeliveryandtransientexpressionofthegene. Althoughtherearereagentsthatincreasetheefficiencyofdelivery, transientexpressionofthetransgeneisaconceptualhu thatincreasetheefficiencyofdelivery, transientexpressionofthetransgeneisaconceptualhurdlethatneedstobeaddressed.」（これらのアプローチの大部分は送達効率の低さ及び遺伝子の一過性発現に悩まされてきた。送達の効率を向上させる試薬はあるが，導入遺伝子の一過性発現は対処する必要のある理論的ハードルである。）・２４２頁（「Clinicaltrials」（臨床試験））「Overhalfofthe 200 clinicaltrialsthathavebeenlaunchedintheUnitedStatesinvolvetherapeuticapproachestocancer.」（米国で開始された２００の臨床試験のうち半分以上が，癌の治療法に関する。）「Thedisappointingoutcomeprobablyliesintheinefficientgene-deliverysystem.」（期待はずれの結果は，おそらく効率の悪い遺伝子送達システムという点にある。） そうすると，本件優先日（平成９年１０月３日）当時，外来の遺伝子を送達して腫瘍（癌）を傷害する種々の試みがなされていたが，導入遺伝子を発現させるプロモーターの活性が不十分であるなどの理由のため上記発現が困難であったり，宿主の免疫反応が障害になったりするなどして，いずれも十分に成功しておらず，これが当時の当業者一般の認識であったことが認められる。 また，インターフェロンのウイルスプロモーターに対する影響に関する論文であるJeromeS. Harms ほか著「Interfero らず，これが当時の当業者一般の認識であったことが認められる。 また，インターフェロンのウイルスプロモーターに対する影響に関する論文であるJeromeS. Harms ほか著「Interferon-γ InhibitsTransgeneExpressionDrivenbySV40orCMVPromotersbutAugmentsExpressionDrivenbytheMammalianMHCIPromoter」（HUMANGENETHERAPY６巻，１９９５年（平成７年）１０月発行，甲３０）１ - 28 -２９１ないし１２９７頁，導入した遺伝子の発現に関する論文であるChristophDehio ほか著「Identificationofplantgeneticlociinvolvedinaposttranscriptionalmechanismformeioticallyreversibletransgenesilencing」（Proc. Natl. Acad. Sci. USA９１巻，１９９４年（平成６年）６月発行，甲４１）５５３８頁ないし５５４２，CarloCogoni ほか著「Transgenesilencingoftheal-1 geneinvegetativecellsofNeurosporaismediatedbyacytoplasmiceffectoranddoesnotdependonDNA-DNAinteractionsorDNAmethylation」（TheEMBOJournal１５巻１２号，１９９６年（平成８年）発行，甲４２）３１５３ないし３１６３頁及び審決が引用する引用例６（甲６）の１１５ nsorDNAmethylation」（TheEMBOJournal１５巻１２号，１９９６年（平成８年）発行，甲４２）３１５３ないし３１６３頁及び審決が引用する引用例６（甲６）の１１５ないし１２２頁によれば，本件優先日当時，遺伝子の発現機構が生体内の何らかの作用によって働かず，導入した遺伝子が発現しない現象（サイレンシング）があること自体は，当業者に広く知られており，対応するプロモーター，エンハンサーと外来の遺伝子を導入しても，所望の結果が得られないことがあることが当業者の認識となっていたことが認められる。 イところで，引用発明１は，アデノウイルスに腫瘍特異的に発現させることのできる発現シグナル，例えばα－フェトプロテインプロモーターやＩＧＦ－ⅡＰ３プロモーターを，発現すると毒性のある産物を産生することになる異種配列（遺伝子），例えばチミジンキナーゼ遺伝子（ｔＫ）とともに組み込んでベクターとし，このアデノウイルスベクターを標的となる腫瘍細胞に感染させて，感染後発現した異種配列に係る毒性産物で当該腫瘍細胞を傷害する発明であるところ，審決は，上記α－フェトプロテインプロモーター等の発現シグナルをＨ１９遺伝子の調節配列のうちのＨ１９プロモーターと置き換え（相違点(i)），標的となる癌（腫瘍）として膀胱癌を選択する（相違点(ii)）ことが容易であると判断したものである。 としても，引用例１には，「既述のようにこの異種ＤＮＡ配列は，腫瘍細胞中で特異的に活性を示す発現シグナルの制御下に置かれる。・・・本発明の好ましい態様ではそれらの配列は，腫瘍の原因となるかもしくは腫瘍に関連するウイルスの存在により誘導されるかもしくはその存在下で活性を示す発現シグナルである。エプスタ - 29 -イン－バール（Epstein-Barr）ウイルス 腫瘍の原因となるかもしくは腫瘍に関連するウイルスの存在により誘導されるかもしくはその存在下で活性を示す発現シグナルである。エプスタ - 29 -イン－バール（Epstein-Barr）ウイルス（ＥＢＶ）もしくはパピローマウイルスにより誘導可能な発現シグナルを本発明の構造内で用いることが更に一層好ましい。・・・これらのプロモーターは正常細胞中では不活性であり，かつ腫瘍細胞では活性を示す発現シグナルであってもよい。具体的には，α－フェトプロテインプロモーター・・・，もしくはＩＧＦ－ⅡのＰ３プロモーター・・・は肝臓癌の場合においてのみ成人に活性を示し，これらを本発明の構成内で使用することが可能である」（１０，１１頁）との記載があるにとどまり，Ｈ１９プロモーターの使用について記載していないし，これが示唆されているともいい難い。 ウ引用例３は，癌細胞におけるＨ１９遺伝子の発現に関する論文であり，本願発明の発明者らもその執筆者に名を連ねているものであるところ，その中には次のとおりの記載がある。 ・３４頁（「Abstract」（要約））「TheH19 geneisanimprinted, maternallyexpressedgeneinhumans. Itistightlylinkedandcoregulatedwiththeimprinted, paternallyexpressedgeneofinsulin-likegrowthfactor 2. TheH19 geneproductisnottranslatedintoproteinandfunctionsasanRNAmolecule. Althoughitsrolehasbeeninvestigatedf translatedintoproteinandfunctionsasanRNAmolecule. Althoughitsrolehasbeeninvestigatedformorethanadecade, itsbiologicalfunctionisstillnotunderstoodfully. H19 isabundantlyexpressedinmanytissuesfromearlystagesofembryogenesisthroughfetallife, andisdownregulatedpostnatally. Itisalsoexpressedincertainchildhoodandadulttumours. ThisstudywasdesignedtoscreentheexpressionofH19 inhumancanceranditsrelationtotheexpressionofH19 inthefetus.・・・Results - TheH19 geneisexpressedintumoursarisingfromtissueswhichexpressthisgeneinfetallife. Itsexpressioninthefetusandincanceriscloselylinkedwithtissuedifferentiation.Conclusions – Basedontheseandpreviousdata, H19 isneitheratumour - 30 -suppres ntiation.Conclusions – Basedontheseandpreviousdata, H19 isneitheratumour - 30 -suppressorgenenoranoncogene. ItsproductisanoncofetalRNA. ThepotentialuseofthisRNAasatumourmarkershouldbeevaluated.」（ヒトにおいて，Ｈ１９遺伝子はインプリンティングされた，母性発現遺伝子である。それはインプリンティングされた父性発現遺伝子であるインシュリン様成長因子２と密接に関連し，そして共に調節されている。Ｈ１９遺伝子産物はタンパク質に翻訳されず，ＲＮＡ分子として機能する。１０年以上にわたってその役割が調べられてきたが，その生物学的機能は依然として完全には理解されていない。Ｈ１９は胚発生の初期段階から胎児期を通じて多くの組織で豊富に発現されており，そして生後，下方制御される。ある種の小児および成人腫瘍においても発現されている。本研究は，ヒト癌におけるＨ１９の発現および胎児におけるＨ１９の発現とのその関係をスクリーニングすることを意図している。 ・・・結果－Ｈ１９遺伝子は，胎児期にこの遺伝子を発現している組織由来の腫瘍において発現されている。胎児および癌におけるその発現は，組織の分化と密接に関連している。 結論－これらのおよび以前のデータより，Ｈ１９は腫瘍抑制遺伝子でも腫瘍遺伝子でもない。その産物は癌胎児性ＲＮＡである。腫瘍マーカーとしてこのＲＮＡを使用できる可能性が検討されるべきである。）・３５頁表１尿路上皮組織（Urothelium）につき，「胎芽葉」が「骨盤内中胚葉（Mesoderm 性ＲＮＡである。腫瘍マーカーとしてこのＲＮＡを使用できる可能性が検討されるべきである。）・３５頁表１尿路上皮組織（Urothelium）につき，「胎芽葉」が「骨盤内中胚葉（Mesoderm），膀胱内尿管内胚葉（Endoderm）」であること，胎児（Fetus）においてＨ１９遺伝子の発現が見られたこと，「肥厚化，異形成，前癌状態」については原発性腫瘍（Carcinomainsitu）でＨ１９遺伝子の発現が見られたことが記載され，また同組織の「腫瘍（Neoplasia）」の欄に，２４例のステージⅠの膀胱癌の４例，２０例のステージⅡの膀胱癌の１３例，２４例のステージⅢの膀胱癌の - 31 -１４例で，それぞれＨ１９遺伝子の発現が見られたことが記載されている。 ・４１頁（「Results」（結果））「UrinarytractThetransitionalmucosaoftheurinarytractinthefetusabundantlyexpressedH19. Noexpressionwasfoundintheadultbladdermucosa. SamplesofbladdercarcinomawereselectedatrandomfromthefilesoftheDepartmentofPathologyandwereexaminedforexpressionofH19, whichwascorrelatedwiththehistologicalgradeofthetumour. H19 wasexpressedinfour (16%) of 24 gradeI, in 13 (65%) of 20 grad ologicalgradeofthetumour. H19 wasexpressedinfour (16%) of 24 gradeI, in 13 (65%) of 20 gradeII, andin 14 (58%) of 24 gradeIIIpapillarytransitionalcellcarcinomasoftheurinarybladder (p = 0.0027, Pearson χ２).H19 wasalsoexpressedin 10 (71%) of 14 samplesofcarcinomainsituoftheurinarybladdermucosa, mostofwhichweretakenfromsitesadjacenttoinvasivecancer.SelectedrecurrentbiopsyspecimensofsevenpatientswithgradesI-IIbladdercarcinomawereexaminedforH19 expression. Twotosevenspecimensfromeachpatient (average 4.4) werestudied. Threepatientshadmultiplerecurrences, butprogressionandinvasiondidnotoccurduringthecourseofthedisease. H19 wasnotexpressedinanyofthebiopsyspecimensofthesepatients. Infourpatients, disease. H19 wasnotexpressedinanyofthebiopsyspecimensofthesepatients. Infourpatients,progressiontoinvasivetumouroccurredduringthecourseofdisease. Intwoofthesepatients, H19 expressionwasevidentintumourcells, eitherfromthefirstbiopsyspecimen (onepatient), orwithprogressiontoinvasivecancer.UsingISH, expressionofH19 wasnotdetectedinanyofthesevenbiopsyspecimensofpatientswithchroniccystitis (interstitialoreosinophilic).」（尿路胎児の尿路の移行粘膜は豊富にＨ１９を発現した。成人の膀胱粘膜においては発現は認められなかった。膀胱癌サンプルはランダムに病理学専攻のフ - 32 -ァイルから抽出し，Ｈ１９の発現を調べたところ，腫瘍の組織学的グレードと相関があった。Ｈ１９は，２４例の悪性度Ｉの膀胱の乳頭移行上皮細胞腫瘍うち４つ（１６％），２０の悪性度Ⅱのうち１３（６５％），悪性度Ⅲの２４例のうち１４（５８％）において発現した（ｐ＝０．００２７）。 Ｈ１９は膀胱粘膜上皮内癌，そのほとんどは浸潤癌に隣接した部位から採取したが，１４のうち１０例（７１％）で発現していた。 悪性度ＩないしⅡの膀胱癌をもつ７人の患者の再発生検標 ｐ＝０．００２７）。 Ｈ１９は膀胱粘膜上皮内癌，そのほとんどは浸潤癌に隣接した部位から採取したが，１４のうち１０例（７１％）で発現していた。 悪性度ＩないしⅡの膀胱癌をもつ７人の患者の再発生検標本を選び，Ｈ１９の発現を調べた。それぞれの患者から２ないし７つ（平均４．４）の標本を調べた。３人の患者は複数再発を経験していたが，進行，浸潤は病気の経過中に起こっていなかった。Ｈ１９は，これらの患者の生検標本のいずれにも発現していなかった。４人の患者では，浸潤性腫瘍への進行が疾患経過中に発生した。このなかの２人の患者では，最初の生検標本（１例）あるいは浸潤癌の進行とともに，腫瘍細胞におけるＨ１９の発現が明らかになった。 ＩＳＨを用いても，慢性膀胱炎（間質性あるいは好酸球性）の患者の７つの生検標本のいずれにおいてもＨ１９の発現は認められなかった。）・４３頁（「Discussion」（考察））「H19 wasfirstdescribedasagenetranscribedinendodermalandmesodermaltissues. Forconvenience, wehaveclassifiedthetissuesandorgansaccordingtotheoriginalembryonicgermlayers. Oneshouldremember, however, thattissuesoriginatingindifferentgermlayersmaymaturealongthesamelineofdifferentiation.WeconcludethatwithregardtoH19 expressionthedominantfa ngthesamelineofdifferentiation.WeconcludethatwithregardtoH19 expressionthedominantfactorisprobablydifferentiation. Forexample, thetransitionalepitheliumoftheurinarytractisderivedfromtheendoderm (thehindgut) inthebladderandfromthemesoderm(mesonephricduct) intheuretersandpelvicalycealsystem. WehaveshownthatH19 isabundantlytranscribedinthetransitionalepitheliumofallpartsoftheurinarytractinfetallifeandintransitionalcellcarcinomasarisingfromit.」 - 33 -（Ｈ１９は当初，内胚葉と中胚葉組織で転写される遺伝子として述べられていた。分かりやすくするために，我々は組織と器官をもともとの胚葉層に従って分類した。しかしながら，異なる胚葉由来の組織も同じ分化の経路を辿って成熟しうることを忘れてはならない。我々は，Ｈ１９の発現に関する支配的因子は恐らく分化であると結論づけた。たとえば，尿管の移行上皮は膀胱内胚葉（腸）や尿管－腎盂腎杯システムの中胚葉（中腎管）から派生する。我々は，胎児期における尿管のすべての部分の移行上皮において，またそこから派生する移行上皮癌においてＨ１９が豊富 の移行上皮は膀胱内胚葉（腸）や尿管－腎盂腎杯システムの中胚葉（中腎管）から派生する。我々は，胎児期における尿管のすべての部分の移行上皮において，またそこから派生する移行上皮癌においてＨ１９が豊富に発現することを示した。） そうすると，引用例３においては，母性発現遺伝子で，タンパク質に翻訳されず，胚形成から胎児期までの間は豊富に発現するが成人の正常細胞では発現が低く制御されるＨ１９遺伝子が，種々の腫瘍（癌）組織において発現していること，膀胱腫瘍（癌）についてもその発現が見られ，腫瘍（癌）の悪性度の進行に伴って発現が見られる割合が大きくなる（ステージⅡ，Ⅲで６割前後，進行した腫瘍である浸潤癌に隣接した膀胱粘膜上皮内癌では７割程度）ことが開示されているということができる。だとすると，引用例３の記載からは，進行した膀胱腫瘍（癌）細胞においてはもともと細胞内に存在する，すなわち内因性のＨ１９遺伝子が発現している蓋然性が高く，同遺伝子がプロモーター及びエンハンサーを機能させる手掛かりとして有望であるといい得るものである。 しかしながら，前記のとおり，本件優先日当時，外来の遺伝子を導入して腫瘍（癌）を傷害するのは，プロモーターの活性が不十分であるなどの理由のため困難であるというのが当業者一般の認識であった上，Ｈ１９遺伝子の生物学的機能は完全には解明されていなかったものである。また，引用例３の表１は，種々の腫瘍においてＨ１９遺伝子の発現の有無の状況が異なることを示すものであることが明らかであるところ，同表には，７例の腎臓のウィルムス腫瘍（癌）のうち４例でＨ１９遺伝 - 34 -子の発現が見られ，また４例の腎細胞癌（腫瘍）ではＨ１９遺伝子の発現が見られなかった旨の記載があるが，引用例６の１１８頁には，ウィルムス腫瘍細胞株であるＧ４０１では 例でＨ１９遺伝 - 34 -子の発現が見られ，また４例の腎細胞癌（腫瘍）ではＨ１９遺伝子の発現が見られなかった旨の記載があるが，引用例６の１１８頁には，ウィルムス腫瘍細胞株であるＧ４０１ではＨ１９遺伝子の発現が見られない旨の記載があり，同一臓器の癌（腫瘍）であっても，Ｈ１９遺伝子の発現には差異があることが分かる。そうすると，引用例３にＨ１９遺伝子の発現の状況が記載されているとしても，この記載に基づく発明ないし技術的事項を単純に引用発明１に適用して，腫瘍（癌）の傷害という所望の結果を当業者が得られるかについては，本件優先日当時には未だ未解明の部分が多かったというべきである。したがって，引用発明１に引用例３記載の発明ないし技術的事項を適用しても，本件優先日当時，当業者にとって，引用発明１のα－フェトプロテインプロモーター等の発現シグナルをＨ１９遺伝子の調節配列のうちのＨ１９プロモーターと置き換え（相違点(i)），標的となる癌（腫瘍）として膀胱癌を選択する（相違点(ii)）ことが容易であると評価し得るかは疑問であるといわなければならない。 エ引用例４はＨ１９遺伝子の５'隣接領域の遺伝子配列等を開示する論文にすぎず，引用例５もＨ１９遺伝子のプロモータードメインやエンハンサードメインの構造等を開示する論文にすぎず，引用例６も，Ｈ１９遺伝子に係るゲノミック・インプリンティングの機序等を明らかにするために，Ｈ１９プロモーターをメチル化してその活性がどの程度抑制されるかという事項等を開示する論文にすぎないのであって，被告主張によっても，Ｈ１９遺伝子のプロモーターが本件優先日当時に当業者に公知であったことを示すために審決が引用したにすぎないものである。そうすると，引用例４ないし６に記載された発明ないし技術的事項を引用発明１に適用して，相違点( プロモーターが本件優先日当時に当業者に公知であったことを示すために審決が引用したにすぎないものである。そうすると，引用例４ないし６に記載された発明ないし技術的事項を引用発明１に適用して，相違点(i)及び(ii)に係る構成に至る動機付けに欠けるし，かように適用したとしても，本件優先日当時，当業者において相違点(i)及び(ii)を解消することは容易でないのであって，引用例４ないし６によって前記ウの結論が左右されるものではない。 したがって，引用発明１に引用例３ないし６記載の発明ないし技術的事項を適用 - 35 -しても，本件優先日当時，当業者にとって，相違点(i)，(ii)に係る構成に想到することが容易であるといい得るかは疑問である。 (2) 加えて，本願明細書の段落【００７８】には，化学的に膀胱腫瘍を発症させたマウスに対し，Ｈ１９調節配列を使用した遺伝子療法を施した実施例につき，「対照及び実験群の間で，腫瘍のサイズ，数及び壊死を比較する。シュードモナス毒素の発現は，マウスの実験群からの膀胱腫瘍内のＨ１９の発現と同時局在化することがわかる。さらに，マウスの実験群の膀胱腫瘍は，マウスの対照群内の膀胱腫瘍に比べてサイズ及び壊死が減少している。」との記載があり（なお，最後の１文は，「膀胱腫瘍のサイズが減少し，膀胱腫瘍が壊死している」の誤りであることが明らかである。），本願発明１のベクターによって，マウスを使用した膀胱腫瘍に対する実験で，対照群に対して膀胱腫瘍の大きさが有意に小さくなり，腫瘍細胞の壊死が見られた旨が明らかにされている。 そして，上記に加えて，本願発明１の発明者らも執筆者として名を連ねている論文である「TheOncofetalH19 RNAinhumancancer, fromthebenchtothepa 記に加えて，本願発明１の発明者らも執筆者として名を連ねている論文である「TheOncofetalH19 RNAinhumancancer, fromthebenchtothepatient」（CancerTherapy３巻，２００５年（平成１７年）発行，審判での参考資料１，甲１０）１ないし１８頁には，Ｈ１９遺伝子調節配列を用いたベクターの効果について，①膀胱癌（腫瘍）を発症させたマウスにジフテリア毒素を産生する遺伝子（ＤＴ－Ａ）等を誘導するプロモーターを使用したベクターを投与したところ，対照のマウスに対して腫瘍の平均重量が４０％少なかったこと，②ヒト膀胱癌（腫瘍）を発症させたヌードマウスにＤＴ－Ａを誘導するプロモーターを使用したベクター（ＤＴＡ－Ｈ１９）を投与したところ，投与しない対照のマウスが腫瘍の体積を２． ５倍に拡大させたのに対し，腫瘍の増殖速度が顕著に小さく，広範囲の腫瘍細胞の壊死が見られたこと，③膀胱癌（腫瘍）を発症させたラットに上記ベクターＤＴＡ－Ｈ１９を投与したところ，対照のラットに対して腫瘍の大きさの平均値が９５％も小さかったこと，④難治性の表層性膀胱癌（腫瘍）を患っている２人の患者に経尿道的に上記ベクターＤＴＡ－Ｈ１９を投与したところ，腫瘍の体積が７５％縮小 - 36 -し，腫瘍細胞の壊死が見られ，その後１４か月（１人については１７か月）が経過しても移行上皮癌（ＴＣＣ）が再発しなかったことが記載されている。また，原告が提出する参考資料である「1.1 CompassionateUseHumanClinicalStudies」と題する書面（審判での参考資料２，甲１１）及び本願発明１の発明者らも執筆者として名を連ねている論文「Plasmid-basedgenetherapyforhuma icalStudies」と題する書面（審判での参考資料２，甲１１）及び本願発明１の発明者らも執筆者として名を連ねている論文「Plasmid-basedgenetherapyforhumanbladdercancer」（QIAGENNEWS 2005，審判での参考資料４，甲１３）にも，上記④と概ね同様の効果に係る記載がある。 本願明細書の段落【００７８】には，具体的に数値等を盛り込んで作用効果が記載されているわけではないが，上記①，②は上記段落中の本願発明１の作用効果の記載の範囲内のものであることが明らかであり，甲第１０号証の実験結果を本願明細書中の実験結果を補充するものとして参酌しても，先願主義との関係で第三者との間の公平を害することにはならないというべきである。 そうすると，本願発明１には，引用例１，３ないし６からは当業者が予測し得ない格別有利な効果があるといい得るから，前記(1)の結論にもかんがみれば，本件優先日当時，当業者において容易に本願発明１を発明できたものであるとはいえず，本願発明１は進歩性を欠くものではない。 (3)ア被告は，当業者であれば，所望の特性を有するプロモーターがあれば，必要な活性を示すか否か，その使用の可否を検討するものであり，ある遺伝子のプロモーターが実際に治療に使えるほどに導入遺伝子を発現できるような高活性なプロモーターであるとは限らなくても，それが腫瘍細胞で特異的に発現していれば，その使用を躊躇するものではないとか，引用例３の表１等では，Ｈ１９遺伝子が腫瘍細胞で特異的に発現することが記載されており，Ｈ１９プロモーターが機能していたことは明らかであるから，当業者がその調節配列の使用を検討することに何ら論理的無理はないなどと主張する。 しかしながら，前記のとおり，導入遺伝子を発現させる ており，Ｈ１９プロモーターが機能していたことは明らかであるから，当業者がその調節配列の使用を検討することに何ら論理的無理はないなどと主張する。 しかしながら，前記のとおり，導入遺伝子を発現させるプロモーターの活性が不十分であるため，腫瘍（癌）を傷害する遺伝子の発現が困難である等の理由で，ベ - 37 -クターを用いた遺伝子治療が十分に成功してこなかったという本件優先日当時の開発状況及び当業者一般の認識にかんがみれば，基本転写因子がプロモーター領域に結合して転写を開始すれば，エンハンサーの制御の下に遺伝子の発現が行われるという一般的な理解（乙１，２参照）を単純に適用し，本願発明１の進歩性を判断するのでは不十分であることが明らかであるから，被告の上記主張を採用することはできない。 また，被告は，引用例１は特異的に毒性遺伝子を発現させて腫瘍を傷害する本件優先日前に公知の技術であるところ，審決は，腫瘍細胞とＨ１９遺伝子発現の活性化との関連が引用例３に記載され，またＨ１９プロモーター領域が引用例４ないし６に記載されていることから，上記公知技術の毒性遺伝子の調節配列として，Ｈ１９プロモーターを用いることは，当業者が容易に想到し得ることであるなどとしたものであって，審決の判断に誤りはないと主張するが，前記のとおりの本件優先日当時の，開発状況及び当業者一般の認識にかんがみれば，腫瘍を傷害する公知の手法（技術）に公知のプロモーターを組み合わせて単純に本願発明１が容易想到であるとするのには疑問があり，また本願発明１は当業者が予測し得ない格別有利な作用効果を奏するから，本願発明1 の進歩性を否定することはできない。 イまた，被告は，本願明細書の９節では，他の実施例には存在する「結果と考察」欄が記載されていない上に，他の実施例では過去形で実験結果が を奏するから，本願発明1 の進歩性を否定することはできない。 イまた，被告は，本願明細書の９節では，他の実施例には存在する「結果と考察」欄が記載されていない上に，他の実施例では過去形で実験結果が記載されているのとは対照的に，現在形で実験結果が記載されているし，原告が真に実験を行っていれば，乙第６号証のように容易にその結果を本願当初明細書に記載できたはずであって，作用効果の記載（段落【００７８】）は，いわば願望を記載したものにすぎない旨を主張する。 確かに，本願明細書（甲７）の他の実施例に係る８，１０，１１節中には「結果と考察」欄がある一方，９節には同欄がなく，９節では現在形で実験結果が記載されている。しかしながら，段落【００７８】を含む９節には曲がりなりにも実験結果が記載されているのであって，記載中の項目立ての体裁や文章の時制が異なるか - 38 -らといって，架空の実験を記載したものと断定することはできない。また，本願発明１の発明者らも執筆者に名を連ねている論文「USEOFH19 REGULATORYSEQUENCESFORTARGETEDGENETHERAPYINCANCER」（Int. J. Cancer９８巻，２００２年（平成１４年）発行，乙６）６４５ないし６５０頁には，膀胱癌（腫瘍）を発症させたマウスにジフテリア毒素を産生する遺伝子（ＤＴ－Ａ）等を誘導するプロモーターを使用したベクター（ＤＴＡ－ＰＢＨ１９）を投与したところ，対照のマウスに対して腫瘍の平均重量が４０％少なく，平均体積も４０％小さかったことが記載されており，これは前記(2)の④の実験結果と同趣旨のものである（なお，甲第１０号証は２００２年に発表した実験結果を引用している。）。しかしながら，かかる論文が存在するからといって，本願発明１の発明 されており，これは前記(2)の④の実験結果と同趣旨のものである（なお，甲第１０号証は２００２年に発表した実験結果を引用している。）。しかしながら，かかる論文が存在するからといって，本願発明１の発明者らが，本件優先日当時に本願発明１のベクターを用いた実験を行っておらず，乙第６号証記載の実験がされるまで必要な実験をしなかったとする被告の主張は，憶測の域を出るものではなく，これを採用することはできない。 (4) 結局，本願発明１は，引用発明１に引用例３ないし６記載の発明ないし技術的事項を適用することにより，当業者において容易に発明することができたものであるかどうか疑問があり，本願発明１によって奏される作用効果は当業者において予測し得ない格別有利なものであるから，本願発明１は進歩性を欠くとはいえない。したがって，これに反して本願発明１の進歩性を否定した審決の判断には誤りがある。 第６ 結論以上によれば，原告が主張する取消事由１は理由がないが，取消事由２は理由があるから，主文のとおり判決する。 知的財産高等裁判所第２部 - 39 - 裁判長裁判官塩月秀平 裁判官真辺朋子 裁判官田邉 実 田邉

▼ クリックして全文を表示